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9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞傳代/復蘇技巧
點(diǎn)擊次數:15 更新時(shí)間:2024-07-01

9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞

,9LlacZ

貨號:YJ-r037(種屬鑒定)

價(jià)格: 1500.0

規格: 1*10 6

細胞介紹

9L/lacZ細胞株1989年從9L細胞株(大鼠硝基脲誘導的膠質(zhì)瘤細胞株)發(fā)展而來(lái)。 用攜帶E. coli編碼beta-半乳糖苷酶lacZ基因和帶來(lái)G418抗性的Tn5新霉素基因BAG復制缺陷的逆轉錄病毒載體感染9L細胞株。 細胞在G418存在下培養14天,克隆,并檢測beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ產(chǎn)生高水平的酶,選擇其進(jìn)行后續研究。 細胞持續表達lacZ報告基因產(chǎn)物,從E. coli衍生來(lái)的beta-半乳糖苷酶,從而可以通過(guò)組織切片的組織化學(xué)染色來(lái)鑒定單個(gè)腫瘤細胞。 同一片子上的淋巴細胞和其它響應細胞也可以通過(guò)雙標記抗體進(jìn)行鑒定。 染色細胞和背景的對比有益于圖像分析。 這是少數允許量化分析的大腦微觀(guān)腫瘤模型中的一種。 這種腫瘤模仿了人類(lèi)大腦腫瘤的生長(cháng)和傳播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表達十分穩定,但細胞培養數月后應該重新進(jìn)行克隆。

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備:1640 基礎培養基(推薦:YJ-0002),優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %P/S 1 %

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞傳代/復蘇技巧


二.細胞處理:

1 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細胞生長(cháng)情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。

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